DNA/RNA-Konzentrations-Rechner

Berechne die Konzentration von doppelsträngiger DNA, einzelsträngiger DNA oder RNA anhand der A260-Absorption und des Verdünnungsfaktors.

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Messparameter

Gib Absorption, Verdünnungsfaktor und Nukleinsäure-Typ ein.

Absorption bei 260 nm (A₂₆₀)

Verdünnungsfaktor (DF)

Nukleinsäure-Typ

250,0 μg/mL

* Entspricht 250,0 ng/μL.

Standard-Extinktionsfaktor 50 μg/mL pro OD

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A260-Werte sollten für präzise Ergebnisse im linearen Lambert-Beer-Bereich zwischen 0,10 und 1,00 liegen.

Nukleinsäure-Molekül	A260 = 1,0 Äquivalent-Konzentration	Extinktionskoeffizient (ε)	Erwarteter A260/A280 Reinheitswert
Doppelsträngige DNA (dsDNA)	50 μg/mL (50 ng/μL)	0,020 (μg/mL)⁻¹ cm⁻¹	1,80
Einzelsträngige DNA (ssDNA)	33 μg/mL (33 ng/μL)	0,030 (μg/mL)⁻¹ cm⁻¹	1,80 – 1,90
Einzelsträngige RNA (ssRNA)	40 μg/mL (40 ng/μL)	0,025 (μg/mL)⁻¹ cm⁻¹	2,00
Oligonukleotide (Primer)	~ 20 – 30 μg/mL	Sequenzspezifisch	1,80 – 2,00

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Konzentration = A₂₆₀ × Faktor × Verdünnungsfaktor

Die UV-Absorption bei 260 nm verhält sich im Bereich von 0,1 bis 1,0 OD streng proportional zur Konzentration.

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Die Doppelhelix-Basenstapelung reduziert die UV-Absorption (Hypochromie). Entfaltung in Einzelstränge steigert A260 um ca. 30 % (Hyperchromie).

Warum misst man Nukleinsäuren bei 260 nm? ▼

Purin- und Pyrimidinbasen in DNA und RNA besitzen ein Absorptionsmaximum bei 260 nm UV-Licht durch ihr konjugiertes Ringsystem.

Welche Umrechnungsfaktoren gelten für DNA und RNA? ▼

Bei 1,0 A260-Einheit (1 cm Küvette): Doppelsträngige DNA (dsDNA) = 50 μg/mL; Einzelsträngige DNA (ssDNA) = 33 μg/mL; RNA = 40 μg/mL.

Wie wirkt sich der Verdünnungsfaktor aus? ▼

Wenn eine Probe vor der Messung verdünnt wird (z. B. 10 μL Probe in 90 μL Wasser = 1:10 Verdünnung), wird die gemessene A260 mit 10 multipliziert.