Enzymaktivität / Spezifische Aktivität Rechner

Berechne die Enzymaktivität in Einheiten (U), die Volumenaktivität (U/mL) und die spezifische Aktivität (U/mg Protein) aus photometrischen Raten.

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Assay-Parameter

Gib Extinktionssteigung, Koeffizient und Volumina ein.

Extinktionsänderungsrate (ΔA / Min.)

Extinktionskoeffizient ε (mM⁻¹ cm⁻¹)

Schichtdicke Küvette (cm)

Gesamt-Assayvolumen (mL)

Zugesetztes Enzym-Probenvolumen (mL)

Proteinkonzentration der Probe (mg/mL)

Volumetrische Aktivität

0,0804 U/mL

Spezifische Aktivität

0,1608 U/mg

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Definition Enzym-Unit (U)

1 Unit (U) = 1 μmol Substratumsatz pro Minute. Katal (kat) ist die SI-Einheit (1 U = 16,67 nkat).

Extinktionskoeffizienten gängiger Chromophore Referenztabelle

Kofaktor / Chromophor	Wellenlänge (λ)	Extinktionskoeffizient ε (M⁻¹ cm⁻¹)	Extinktionskoeffizient ε (mM⁻¹ cm⁻¹)
NADH / NADPH (Oxidoreduktasen)	340 nm	6.220 M⁻¹ cm⁻¹	6,22 mM⁻¹ cm⁻¹
p-Nitrophenol (pNPP / Alkalische Phosphatase)	405 nm	18.500 M⁻¹ cm⁻¹	18,5 mM⁻¹ cm⁻¹
o-Nitrophenol (ONPG / β-Galaktosidase)	420 nm	4.500 M⁻¹ cm⁻¹	4,50 mM⁻¹ cm⁻¹
Ferricyanid (Elektronenakzeptor)	420 nm	1.000 M⁻¹ cm⁻¹	1,00 mM⁻¹ cm⁻¹

Berechnungsmethodik & Formeln

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Volumetrische Aktivität (U/mL)

Vol Aktivität (U/mL) = (ΔA/min × V_assay) / (ε × d × V_probe)

Wobei ΔA/min die Steigung ist, V_assay das Gesamtvolumen (mL), ε der Extinktionskoeffizient (mM⁻¹ cm⁻¹), d die Schichtdicke (cm) und V_probe das Enzymvolumen (mL).

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Spezifische Aktivität (U/mg)

Spezifische Aktivität (U/mg) = Volumetrische Aktivität (U/mL) / Proteinkonzentration (mg/mL)

Ein Maß für die Enzymreinheit. Bei Reinigungsschritten steigt die spezifische Aktivität an.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Was ist der Unterschied zwischen Enzymaktivität (U/mL) und Spezifischer Aktivität (U/mg)? ▼

Die volumetrische Enzymaktivität (U/mL) misst die Katalyseeinheiten pro Milliliter Lösung. Die Spezifische Aktivität (U/mg) teilt diesen Wert durch die Proteinkonzentration (mg/mL) und ist ein Maß für die Enzymreinheit.

Wie ist eine Enzymeinheit (U) definiert? ▼

Eine Internationale Einheit (U) Enzymaktivität entspricht der Enzymmenge, die unter Standardbedingungen 1 Mikromol (μmol) Substrat pro Minute umsetzt.

Welche Einheit muss für den Extinktionskoeffizienten ε eingegeben werden? ▼

Gib den Extinktionskoeffizienten in mM⁻¹ cm⁻¹ ein. Falls der Wert in M⁻¹ cm⁻¹ vorliegt, teile ihn durch 1.000.